分析测试百科网讯 8月16日第二届全国样品制备学术报告会的下午报告内容精萃：
北京大学白玉：基于新型纳米材料的磷酸化肽富集新方法研究
北京大学的白玉教授做题为《基于新型纳米材料的磷酸化肽富集新方法研究》的报告。蛋白质组研究中的磷酸化翻译后修饰是非常重要的，而方法策略中必须进行 有效富集。2012年Cell综述介绍：在富集策略方面，近年来发展了免疫沉淀、IMAC、SCX、MOAC（金属氧化物亲和色谱）和其它种方法。白教授 主要介绍MOAC方法。磷酸化肽的磷酸根和金属氧化物形成配位作用，进行富集，加入相对偏碱性的如氨水即能解吸附。MOAC的特性为：形貌不同的金属材料 富集行为差异；组成不同的金属材料富集行为差异；稀土金属化合物诱导去磷酸化现象；不同功能化纳米材料的富集行为差异。白玉教授主要介绍了课题组发展的几 种MOAC材料和研究的结果，其中，二元材料ZnSn(OH)6-SnO2，适于单多磷酸化肽；多孔材料如Porous SnO2，方法简单富集效果好；稀土材料GdF3 是新型稀土富集材料；功能纳米材料Guanidyl-functionalized graphene，适用于双功能/连续磷酸化肽。
车金水：赛默飞Online GPC-GC/MS技术及在食品分析中的应用
赛默飞的应用工程师车金水做了题为《赛默飞Online GPC-GC/MS技术及在食品分析中的应用》的报告。赛默飞提供ASE加速溶剂萃取仪（ASE150和ASE350型）和大体积固相萃取仪 （AutoTrace 280）。车金水接下来介绍赛默飞GPC-GC/MS技术，并介绍了其在分析蔬菜中181种农药多残留和食品中污染物的应用。该系统由Ultimate 3000和Trace GC 1310-ISQ气质联用仪组成，柱子采用Shodex EV-200商品化柱。广州CIQ等单位已购买该设备。技术亮点为：（1）在LC-GC接口方面使用单六通阀，连接简单；（2）吹扫气控制，背景低。 （3）GC-MS扫描的质量可以从50开始，对低分子量的目标组分没有歧视。（4）大体积进样技术。
赛默飞在线GPC-GC/MS的优点为：（1）优良的净化效果，更高的结果准确度。（2）前处理简单，可结合QuEChERS方法快速分析农药多残留。（3）溶剂消耗少，维护成本低，24小时溶剂消耗仅为144mL。（4）仪器重现性好，不受人为操作影响。
除在线GPC-GC/MS外，车金水还介绍了赛默飞Online SPE-HPLC法测定腊肉/香肠中苯并[alpha]芘的含量的应用；该系统基于赛默飞特色的双三元液相色谱（DGLC）的在线固相萃取/浓缩过程，可 对复杂样品进行简单方便、快速、完全自动化的前处理。特色为：第一维SPE小柱从基体中分离待测物；将待测物转移至分析柱并在分析柱上分离、测定(洗脱液 无吹干、定容)；分析过程中，SPE 小柱同时进行清洗、再生。
中粮营养健康研究院杨永坛：食用油中危害成分分析的样品制备技术
中粮营养健康研究院的杨永坛研究员做题为《食用油中危害成分分析的样品制备技术》的报告。他首先介绍了食用油的食品安全研究背景。2013年我国食用油 的消费量达3167.4万吨，人均23.25kg/人；包括大豆油、菜籽油、花生油、玉米油、山茶籽油等。在从农田到餐桌的工艺中，危害物污染来源包括： 环境污染、加工过程污染、包装污染；危害物污染种类包括：农药残留、真菌毒素、苯并(a)芘、增塑剂、3-氯丙醇酯；食用油危害成分分析的关键难点：就是 食用油分析中的样品前处理技术。
食用油危害成分分析中常用的样品前处理技术有：液液分配，但液液分配净化效果较差，杂质干扰严重；分散固相萃取法；固相萃取法；凝胶渗透色谱法；多功能净化柱法；免疫亲和柱色谱法；化学处理法：如检测部分农药残留的磺化法和检测3-氯丙醇酯的酸水解法。
杨研究员随后介绍了几种方式包括：可实现“一步式”样品前处理方式分散固相萃取（dSPE）；凝胶渗透色谱法；柱后衍生法；多功能净化柱；免疫亲和柱 法；并比较了多功能净化柱和免疫亲和柱法的特点。杨研究员还举例介绍了食用油危害成分分析的样品技术。如食用油中真菌毒素（如黄曲霉毒素）、增塑剂、苯并 (alpha)芘、氯丙醇酯等危害成分分析。最后介绍了GC-MS/MS测定食用油中四类危害成分的方法，研究对象为：《GB 2763-2014 食品中农药最大残留限量》对食用油有限量规定的农药、23种邻苯二甲酸酯、16种多环芳烃化合物、以及3种抗氧化剂。通过GPC处理食用油样品，仪器检测 使用气相色谱-串联质谱。
磐合科仪蒋家奎：在线样品前处理与联用分析技术的产品及应用
上海磐合科学仪器股份有限公司的技术总监蒋家奎先生做题为《在线样品前处理与联用分析技术的产品及应用》的报告。他主要介绍了大气中挥发性有机物 （VOCs）在线监测系统及应用；以及在线SPE-LC/MS分析联用平台及应用。磐合科仪的大气中挥发性有机物（VOCs）在线监测系统组成包括：在线 采样系统（双冷阱设计和电子控温），色谱分离系统（可配普通GC和快速GC），和检测系统（如FPD、四极杆质谱、TOF质谱）。该系统应用特点为：可安 装在移动的监测车、路边站和常规的实验室中使用；在线监测大气中臭氧前体物，大气中非甲烷碳氢化合物NMHCs、卤代烃、含氧有机物、含氮有机物；环境空 气VOCs的昼夜变化和来源分析；分析大气中含氟化合物，恶臭硫化物等。
磐合科仪的在线SPE-LC/MS分析联用平台组成包括：在线 SPE系统（包括固相萃取SPE，定量浓缩EVA，真菌毒素处理模块）；LC/MS在线进样模块；分析检测系统（可接市售主流品牌LC/MS）。该系统应 用特点为：适用于食品安全﹑环境监测、药物研发﹑临床诊断及药理毒理和公安刑侦分析等领域；适合农残，兽残，抗生素，毒品，兴奋剂、食品非法添加物和真菌 毒素等分析。
浙江大学周建光：现场水体全组分富集溯源技术
浙江大学分析仪器研究中心的周建光教授做题为《现场水体全组分富集溯源技术》的报告。面对中国水源严重污染的现状，现场快速溯源技术和方法仍是难题。周 教授课题组提出一种新颖的研究思路。世界现存化合物7500万种且每年以百万种的速度增长，其中90％以上是有机化物物，而元素种类只有110多种（见元 素周期表），课题组提出的思路为：基于新型材料建立元素比法溯源新技术（目前国内尚未有元素比溯源方面的相关研究），预期优点为：数量稳定、快速方便、极 易推广。
研究常见重金属吸附材料和有机物固相吸附材料，课题组提出要选择一种成本低的材料。中国石墨产量很高（比如山东即墨），价格便 宜。石墨酸化后可做膨化石墨，再往下做氧化石墨烯，还原可做石墨烯。膨化石墨吸附力是广谱的，特别对有机物吸附能力很强；把可吸附重金属的石墨“塞进”膨 化石墨中，就可以具有特别高的吸附广谱性。膨化石墨中关键的参数是孔隙率要控制，可用低场核磁、拉曼、SEM进行结构表征。最后可将吸附材料做成富集萃取 柱，实现现场快速高倍富集。另外该材料还可做单体传感器。
周教授还介绍了MPT（微波等离子体炬）技术结合质谱，可利用全元素离子化质 谱分析技术，实现对有机物和无机物的广谱分析。用氦气做工作气体，就可以电离周期表中所有元素。通过分段或集中式的控制，可以做有机物分析或无机物分析 （更高温度），类比来说，可以同时实现DART和ICP的功能；后面连接四极杆质谱。目前的研究数据表示，溯源结果是正向的。
清华大学邢志：低温等离子体蒸汽发生分析方法研究
清华大学分析中心的邢志做题为《低温等离子体蒸汽发生分析方法研究》的报告。首先他介绍了研究背景，化学蒸汽发生-原子荧光光谱（CVG-AFS）中可 分为有THB（硼氢化物）的方法和无THB的方法。传统原子荧光使用硼氢化钾/ 钠法产生蒸汽发生；近年来还有紫外灯照射、甲酸乙酸等产生活性氢等方法产生蒸汽发生。无THB氢化物发生元素检测方法，拓展了可检测元素的范围，但是仍需 要有机试剂参与反应，测试过程的干扰和实际污染不可避免。那么，无试剂直接氢化物发生的活性氢是否可以来源于氢气？那么可以实现更长期的连续在线采样测 定。
等离子体分为高温和低温等离子体，那么是否可以形成氢等离子体？把氢气通过一个高压低频、成本低廉的放电通道。产生低温等离子体的 装置-介质阻挡放电（DBD），在两个电极之间插入一个介质，放电时就呈现丝网式的均匀的放电。课题组把氢气和氩气混合，用双阻挡层的介质阻挡放电通道， 形成非常强的混有氢的等离子体气（氩气为载气）。样品用双层带鞘流的喷雾毛细管，在出口形成均匀的µｍ级的雾滴，让雾滴穿过氢等离子通道时，就可产生大量 的信号，后面用原子荧光检测。对比各种条件的实验证明，只有在放电通道打开且通氢气时，才会产生信号。用水电解产生氢气，不用硼氢化物，这种方法就可以产 生原子荧光的信号；还可以同时测定几个元素。这样就可以长时间在线分析。比如可设计成“只加水的原子荧光”。
课题组还用产生氢等离子体 的方法，探索了固体表面样品的分析，并搭建了DBD固体样品剥蚀及表面分析装置，比如分析硒蛋白。以前分析用凝胶电泳法分离后，再挖下斑点进行消解 ICP-MS。但干扰大，需加碰撞反应池，灵敏度比不加碰撞反应池就直接降低了4-5倍。而原子荧光不存在Se的干扰，所以课题组也探索了直接分析凝胶上 Se斑点的方法。
邢老师总结说，课题组提出了一种新型蒸汽发生装置与AFS连用新方法：基于介质阻挡放电作为蒸汽发生手段，利用原子光 谱仪器作为检测单元，进行液体及固体样品分析。与现有液体样品分析手段相比，具有设备简单，无试剂的优点。此方法为现有原子荧光光谱仪小型化提供了新的途 径。
德国联合分析系统解强：EPICS：简捷农药分离和浓缩系统
德国联合分析系统有限公司（JAS）的解强工程师做题为《EPICS：简捷农药分离和浓缩系统》的报告。EPICS是一种全自动农药残留分析系统，将样 品初级提取物自动净化浓缩，然后进行LC-MS/MS测定，目前可检测农药类别超过300种。该系统针对不同的食品样品基质，进行自动分离和定量分析。最 低检测限可低至1-10ppb。
EPICS的仪器配置为：HILIC亲水色谱柱用于从基质中分离农药；在亲水色谱柱和反相色谱柱中间连接有一个吸附阱；农药将被“聚焦”和吸附；农药将由标准的反相色谱柱进行色谱分离。
EPICS的优点为：高样品通量，提高了生产力；无样品制备过程，只需乙腈萃取；用二维色谱净化样品；数据质量佳，因为EPICS提供了最佳的基质分离；从一个粗萃取物可以直接分析所有的农药；尽管样品基质复杂，但依然有好的回收率。
博纳艾杰尔陈小华：LC-MS/MS检测中的生物样品前处理
博纳艾杰尔科技的陈小华经理做了题为《LC-MS/MS检测中的生物样品前处理》的报告。陈经理介绍说，公司30%的产品销往国外，其中一个大客户是 Quest，第三方检测占了美国临床检测80%的市场，Quest是其中非常重要的公司。生物分析领域（BA，Bioanalysis）包括：临床诊断 (Clinical Diagnosis)，体外诊断（In Vitro Diagnosis），药物动力学 (DMPK)，基因组学 (Genomics)，蛋白组学 (Poteomics)，代谢组学 (Metabolomics)。博纳艾杰尔主要涉及小分子领域。LC-MS/MS为生命科学带来了飞跃式的发展，灵敏度高、准确度高、重现性好、定量分析 线性范围广、自动化高通量，适用于小分子药物、生物标志物定量分析。
生物分析特点为：（1）生物样品数量大，需要高通量的样品处理和检 测手段。（2）样品量小，比如几十微升-几百微升，新生儿筛查只用3 mm 直径的干血斑；雄激素水平检测约用50 μL血清/血浆；叶酸检测用< 300 μL血清。（3）基质效应多，比如：生物样品中的磷脂、蛋白质、盐等有离子增强、离子拟制效应，会直接影响对目标化合物的定量分析，故在进行LC- MS/MS分析前必须除去。
艾杰尔可提供：（1）高通量蛋白沉淀法，使用96孔蛋白沉淀板：无需离心，正/负压收集洗脱液。（2）高通 量MAS法（改良QuEChERS法），MAS (Multi-function Impurity Adsorption SPE)，MAS 即“多重机制杂质吸附萃取净化法”，该方法主要利用多官能化的复合吸附材料，以离子交换、反相、氢键等机理去除生物样品中的主要内源性干扰物质，同时将目 标药物留在样品溶液中，从而达到净化和富集的目的。（3）高通量SLE法，Supported Liquid Extraction 固体支持液液萃取(Soild Supported Liquid Extraction)。（4）高通量SPE法；（5）高通量microSPE法。陈经理并举例了上述各种方法的各种应用。
武汉大学冯钰锜：基于天然材料样品前处理方法
武汉大学的冯钰锜教授做题为《基于天然材料样品前处理方法》的报告。冯教授所在分离分析新技术与生物分析课题组，挑战各种复杂的样品。
冯教授首先介绍腐殖酸（HAS），HAS作为一种天然的寡聚物，已被证明含有烷基和芳环的骨架并附有羧酸基、酚羟基等官能团；HAS结构上的特点与传统 的MALDI基质相似，并对小分子不产生干扰，适用于测定小分子。腐殖酸作为优良的吸附剂已被用于多种有害物质（如：多环芳烃，重金属离子，氯酚，杀虫剂 等）的分离和富集；固体腐殖酸无需提取，价廉易得；可以作为潜在的MALDI基质。直接将罗丹明B点到腐殖酸上进入分子量检测，可以获得高信噪比，背景干 扰少。实例表明灵敏度高、抗干扰能力强。
其次介绍了巯基棉，是否可以巯基的反应活性和巯基的配位功能让巯基棉研究“老树开新花”。课题 组制备了巯基棉-苯硼酸（SCF-PBA）和巯基棉-乙烯基膦酸-锆离子（SCF-pVPA-Zr4+），可以有效富集磷酸化肽和糖基化肽。课题组还制备 出巯基棉-镍（SCF -Ni2+ ）并表征，可以用于标准组氨酸蛋白的选择性富集，在实际样品中也证实，SCF-Ni2+用于大肠杆菌裂解液中组氨酸蛋白的选择性分离，证明该材料可以从复 杂体系中成功纯化组氨酸蛋白。羧基棉-钛（CCC-Ti4+）的制备及其在磷酸化多肽富集中的应用中，用CCC-Ti4+富集鼠脑组织中的磷酸化肽，在1 mg鼠脑蛋白中鉴定出了3950个磷酸化肽和4304个磷酸化位点。
最后介绍了花粉。花粉外壁主要成分为孢粉素，特点为：机械强度 高，耐高温（275℃），抗强酸强碱，难生物分解，富含功能团，粒径30-40 um，环境友好。将其填入SPE，用LC-MS/MS法测定16种植物生长调节剂（外源性激素），检出限和回收率都很好。做成正相模式后，也可成功测定植 物油中白藜芦醇等。
西安近代化学研究所张皋：火炸药分析用样品前处理技术研究
西安近代化学研究所的张皋主任做题为《火炸药分析用样品前处理技术研究》的报告。在火炸药样品前处理技术研究中，由于样品的特殊性，较少有人研究，技术 落后，成为整个检测过程的瓶颈。项目组的研究目标为：（1）保证新方法检测准确性，使新方法可以代替旧方法（如：样品的浸润、分散）。（2）缩短整个检测 时间（如：如样品驱水、提取）。张主任接下来举例介绍了一些前处理研究。
首先是浸润与分散技术。比如：硝化棉含氮量测定法，以前的三种 方法已废止（五管氮量法：容易引起汞中毒；狄瓦尔德合金法操作繁琐，难以掌握；干涉仪法设备已停产）。课题组发展了偏光显微镜法，但同时需发展浸润与分散 的前处理技术，张主任随后介绍了项目组发展的方法。另一个例子是：超细粒径的单质炸药（如奥克托今）的应用日益广泛，而经典的水筛法安全隐患、劳动强度较 大，因此需要研究新检测方法。项目组研究了激光衍射法，同样也要发展浸润与分散的前处理技术。
其次是样品驱水技术，硝化甘油（NG）不 能直接运输，运输前需用硝化棉吸收NG，），制成吸收药。为运输安全，吸收药还含有20%~40%的水。吸收药中水分含量非常不均匀，要驱水后进行组分检 测。由于NG受热后易挥发分解，所以吸收药烘水时温度不能高于55℃（NG是低挥发性液体物质，不能用抽真空法烘水），温度低水分挥发慢，需要4小时左 右。项目组因此研究新方法，缩短驱水时间。项目中采用先压延水分至1-3%后，再烘干的方式，把驱水时间从4小时缩短到1小时；而且用用卡尔费休法分别检 测两种方法驱水后的药料中的残余水分的结果表明，新方法法比原方法水分驱除更干净，数据平行性更好
第三是组分提取技术。项目组对于有机 物和无机物，分别开发了一系列组分提取技术，再进行色谱法分析和定量。由于火炸药不断发展和改性，用传统索氏提取方法效率变差，甚至达30小时，所以需研 究新提取方法，减少提取时间。考虑到火炸药不能高温，溶胀等特殊性，改进方法时需尝试更好的条件，将超声波萃取、微波萃取、高温高压法萃取等民用法用于火 炸药样品的提取。结果表明，高温高压法适用于大多数火炸药的提取。
安捷伦、岛津、迪马科技、德国联合分析系统有限公司、青岛正贞为会议提供了赞助，并在展台上展示了产品。
DIKMA科技
青岛正贞分析仪器有限公司
德国联合分析系统有限公司
